Project B08 - Transmembrane Signaling in Bacterial Adenylate Cyclases

Prof. Dr. Joachim E. Schultz

Eberhard-Karls-Universität Tübingen
Fakultät für Chemie und Pharmazie
Pharmazeutisches Institut
Auf der Morgenstelle 8

72076 Tübingen

Tel.: 07071/29-72475
Fax: 07071/29-5952
E-mail: joachim.schultz@uni-tuebingen.de

Staff

Ph.D. students:

Anubha Seth Tel. 29-7334; anubha.seth@uni-tuebingen.de

Tecnicians (GA):

Ursula Kurz Tel. 29-74681; ursula.kurz@uni-tuebingen.de;

Anita Schultz Tel. 29-74676; anita.schultz@uni-tuebingen.de

Zusammenfassung

Wir charakterisieren den Mechanismus der Signalübertragung durch die Quorum-Sensor-Rezeptoren von Vibrio cholerae und Legionella pneumophila. Dazu verwenden wir Chimäre mit einer mycobakte-riellen Adenylatcyclase, in der die Membrandomäne funktionell durch die Sensoren ersetzt worden ist. Wir verwenden bioinformatische, biochemische und physiologische Methoden (Cluster-Analyse, Struk-turanalyse, rekombinante Proteine, Adenylatcyclase und ß-Galaktosidase Tests, MacConkey Agar Platten, FRET Analyse). Die Ergebnisse sollen helfen, künftig Liganden für zahllose bakterielle `Rezeptorwaisen‘ zu identifizieren, die als Signalausgabesystem intrazelluär cAMP produzieren.

Summary

The quorum-sensing receptors from Vibrio cholerae and Legionella pneumophila have six transmem-brane α-helices, known ligands and regulate histidine kinases. The membrane anchors are identical in design as those of many adenylate cyclases. Ligand regulation by quorum-sensors was achieved in respective chimeric cyclases. We use bioinformatics, biochemical and physiological methods (cluster and structure analysis recombinant proteins, adenylate cyclase and ß-galaktosidase assays, Mac-Conkey agar plates, FRET analysis) to study the mechanism of quorum-sensor transmembrane sig-naling. The data shall serve as a prelude to identify ligands of bacterial orphan receptors.